交联剂在分子层面起着关键作用，它通过与两个或更多分子结合，形成稳定连接，将它们紧密结合在一起。早期，戊二醛因其广泛应用于蛋白质连接，如抗体和酶，但其随机的交联位点可能导致多聚体结构的杂乱。进入80年代，研究人员开始采用更具特异性的交联剂，如NHS（对-COOH）和马来酰亚胺（对-HS），这些在生命科学研究领域展现出更大的优势，尤其是在蛋白质相互作用研究、免疫学和癌症治疗等领域，它们带来了意想不到的突破。据统计，截至2010年，市面上的蛋白质交联剂种类繁多，达上千种。
蛋白质交联剂主要分为三类：同源交联剂、异源交联剂和光反应交联剂。同源交联剂有两个相同的活化反应基团，适用于一步反应、分子内交联和多聚反应，有利于稳定蛋白质的四级结构。异源交联剂则具有不同活化基团，通过两步反应减少聚集和自身交联。光反应交联剂则利用光照进行交联，首先与不稳定基团反应，再通过紫外线连接两种蛋白质，虽然非特异性较强，但交联效率相对较低。
