双脱氧核苷酸（Dideoxynucleotide，简称ddNTPs）是一类化学名称为2',3'-双脱氧核苷酸的化合物，主要包括ddATP、ddCTP、ddGTP和ddTTP四种形式 。其分子结构因核糖的2'和3'位羟基缺失而无法形成磷酸二酯键，故作为链终止剂应用于SangerDNA测序法，通过随机掺入DNA链抑制聚合酶催化链延长，生成不同长度测序片段 。该物质需配合金属离子活化剂使用，纯度标准要求ddNTPHPLC面积≥98%且ddNDP杂质≤1.5%，存储于-20°C环境 。
双脱氧核苷酸制备方法包含四步化学反应流程，具有总收率高、设备要求低的特点 。其应用范围涵盖病毒耐药突变检测、HIV逆转录酶抑制研究及高通量测序试剂盒开发，检测灵敏度与特异度在临床试验中已验证 。作为第一代测序技术的核心试剂，ddNTPs至今仍为分子生物学基础工具
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